Лабораторне заняття 5
Тема: Якісні реакції на жиророзчинні вітаміни (А, Д, Е). Якісні реакції на водорозчинні вітаміни (В2, В6, С, РР).
Мета: навчитися виявляти вітаміни в різноманітних речовинах або біологічних рідинах, застосовуючи якісні реакції.
Практичне значення роботи. За допомогою якісних реакцій вітаміни можна виявляти в лікарських рослинах, препаратах і харчових продуктах.
Матеріали та реактиви: штатив для пробірок, пробірки, піпетки, пісочна баня, водяна баня; 1%-й розчин сульфанілової кислоти та 5%-й розчин натрій нітриту − діазореактив, 10%-й розчин натрій карбонату, 5%-й розчин тіаміну (В1), розчин вітаміну В2, концентрована хлоридна кислота, металевий цинк (Zn); 3%-й розчин вітаміну РР, 5%-й розчин купрум ацетату; 1%-й розчин вітаміну В6, 1%-й розчин ферум (III) хлориду; 0,1%-й розчин аскорбінової кислоти, 0,01%-й розчин метиленового синього; риб’ячий жир у хлороформі, концентрована сульфатна кислота, розчин брому у хлороформі (1:60).
Якісні реакції на водорозчинні вітаміни
Дослід 1. Діазореакція на вітамін В1
Принцип реакції. У лужному середовищі тіамін із діазореактивом утворює складну комплексну сполуку оранжевого або червоного кольору.
Хід роботи: До діазореактиву, що складається з 5 крапель розчину сульфанілової кислоти та 5 крапель 5%-го розчину натрій нітриту, додають 1-2 краплі розчину тіаміну (вітаміну В1), потім по стінці, нахиливши пробірку, обережно додають 5-7 крапель 10%-го розчину натрій карбонату. На межі двох рідин утворюється кільце оранжевого кольору.
Дослід 2. Реакція на вітамін С
Принцип реакції. Аскорбінова кислота легко вступає в окисно-відновні реакції та відновлює метиленовий синій. При цьому метиленовий синій відновлюється в безбарвну сполуку.
Хід роботи. У дві пробірки вносять по 1 краплі розчину метиленового синього і додають по 1 краплі 10 %-го розчину натрій карбонату. У 1-у пробірку додають 5 крапель розчину аскорбінової кислоти, у 2-у пробірку – 5 крапель води. Обидві пробірки ставлять у термостат при t = 37-40 0С.
Через деякий час у пробірці з розчином аскорбінової кислоти спостерігають знебарвлення рідини.
Якісні реакції на жиророзчинні вітаміни
Дослід 1. Реакція на вітамін А
Принцип реакції. При взаємодії вітаміну А, що міститься в риб’ячому жирі, із концентрованою сульфатною кислотою з’являється червоне забарвлення.
Хід роботи. У суху пробірку наливають 3 краплі ретинолу та додають 1 краплю концентрованої сульфатної кислоти. Спостерігають появу фіолетового забарвлення, яке переходить у червоно-буре.
Дослід 2. Реакція на вітамін D
Принцип реакції. Вітамін D, що міститься в риб’ячому жирі, при взаємодії з розчином брому у хлороформі набуває зеленувато-блакитного забарвлення.
Хід роботи. У суху пробірку вносять 2-3 краплі риб’ячого жиру та 2-4 краплі розчину брому у хлороформі (1:60). Про наявність вітаміну D свідчить поява зеленувато-блакитного забарвлення.